name: Создание безмаркерных растений томата и яблони с геном суперсладкого белка
keyword_list: ПРОМОТОР, ELIP, E8, GUSA, РЕПОРТЕРНЫЙ ГЕН, СУПЕРСЛАДКИЙ БЕЛОК, ТАУМАТИН, БЕЗМАРКЕРНЫЕ РАСТЕНИЯ, ВЫСОКИЙ УРОВЕНЬ ЭКСПРЕССИИ, ТОМАТ, ЯБЛОНЯ
abstract: Дано описание промотора гена раннего светоиндуцибельного белка (ELIP) томата. В его последовательности выявлены различные цис-регуляторные элементы. Функциональный анализ промотора ELIP выявил, что «полная» версия промотора способна обеспечивать высокий уровень экспрессии репортерного гена в спелых плодах томата. Промотор ELIP является потенциальным мощным инструментом для применения в биотехнологии растений. Для получения безмаркерных растений томата и яблони использована векторная система pMF1, которая включает индуцибельную сайт-специфическую рекомбиназу и бифункциональный селективный ген. В качестве смыслового выступил ген суперсладкого белка тауматина II из тропического растения Thaumatococcus daniellii под контролем преимущественно плодоспецифичных промоторов генов ELIP (только для томата) и Е8 томата и терминатора гена малой субъединицы рибулозобисфосфаткарбоксилазы томата. С использованием различных стратегий ранней и отсроченной селекции разработан протокол для получения полностью безмаркерных растений томата. Статус растений подтвержден с помощью полимеразной цепной реакции и саузерн-блоттинга. Экспрессия гена тауматина II детектирована с помощью ПЦР, сопряженной с обратной транскрипцией и вестерн-блоттинга. Плоды трансгенных и безмаркерных линий томата показали сладкий вкус. В безмаркерных растениях яблони на уровне РНК показана экспрессия гена сверхсладкого белка в широком диапазоне. Сублинии с высоким уровнем экспрессии целевого гена размножены и привиты на карликовый подвой для ускоренного плодоношения, что позволит в ближайшем будущем оценить уровень белка в плодах яблони и провести органолептический анализ. Созданные растения томата и яблони с геном суперсладкого белка тауматина не содержат в своем геноме селективных генов, использовавшихся при отборе растений, экспрессионная кассета целевого гена состоит только из растительных элементов.
chairman_dissertation_council.surname: Иванов В. Т.
chairman_dissertation_council.position: Научный руководитель ИБХ РАН
chairman_dissertation_council.degree: Доктор химических наук
organization_supervisor.surname: Габибов А. Г.
organization_supervisor.position: Директор
organization_supervisor.degree: Доктор химических наук
rubrics.code: 34.15.27
rubrics.name: Генетическая инженерия
rubrics.code: 62.37.29
rubrics.name: Генетическая инженерия растений
oecds.code: 02.08.DB
oecds.name: BIOTECHNOLOGY & APPLIED MICROBIOLOGY
oecds.code: 01.06.CQ
oecds.name: BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY
speciality_codes.name: Молекулярная биология
speciality_codes.code: 03.01.03
supervisors.fio: Долгов С. В.
supervisors.scientific_degree: Доктор биологических наук
supervisors.speciality_code: Биотехнология (в том числе бионанотехнологии)
supervisors.responsible_type: Научный руководитель
opponents.fio: Голденкова-Павлова И. В.
opponents.scientific_degree: Доктор биологических наук
opponents.speciality_code: Генетика
opponents.responsible_type: Оппонент
opponents.fio: Камионская А. М.
opponents.scientific_degree: Кандидат биологических наук
opponents.speciality_code: Молекулярная биология
opponents.responsible_type: Оппонент
protection_organization.short_name: ИБХ РАН
protection_organization.name: Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук
protection_organization.ogrn: 1037739009110
protection_organization.organization_type: Организация
protection_organization.okogu: Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
protection_organization.okopf: Федеральные государственные бюджетные учреждения
author_organization.short_name: ИБХ РАН
author_organization.name: Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук
author_organization.ogrn: 1037739009110
author_organization.organization_type: Организация
author_organization.okogu: Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
author_organization.okopf: Федеральные государственные бюджетные учреждения