name: Молекулярные основы функционирования белков семейства 14-3-3
keyword_list: Белок-белковые взаимодействия Фосфорилирование Структура белка Олигомерное состояние
abstract: Диссертационная работа Случанко Н.Н., выполненная лично автором или под его руководством в ФИЦ Биотехнологии РАН (научный консультант - чл.-корр. РАН Гусев Н.Б.), посвящена исследованию белок-белковых взаимодействий с участием эукариотических белков 14-3-3. Проведено комплексное структурно-функциональное исследование. Впервые определены пространственные структуры нескольких комплексов 14-3-3 с белками-партнерами и их фрагментами, а также разработаны оригинальные подходы для более быстрого и удобного получения фосфорилированных белков и их комплексов 14-3-3, облегчающих структурные исследования. Продемонстрирована применимость подхода, основанного на химерах 14-3-3 с фосфопептидами, для решения структур физиологически значимых комплексов. 
  Ведущая организация – ФГБУ ИБХ РАН, оппонентами выступили академик РАН Кочетков С.Н. (ФГБУ ИМБ РАН), проф., д.б.н. Ширинский В.П. (ФГБУ НИИ Кардиологии) и проф., д.б.н. Гривенников И.А. (ИМГ НИЦ Курчатовский институт). Основные выводы работы: 
  1.	Впервые установлена трехмерная структура полноразмерного малого белка теплового шока HSPB6 в комплексе с универсальным регуляторным белком 14-3-3, и локализованы участки, применимые для создания фармакологических соединений, способных регулировать взаимодействие этих белков и сократительную активность гладких мышц. 
  2.	Установлен механизм образования, прочность и стехиометрия комплекса 14-3-3 с фосфорилированным HSPB6, показана ключевая роль связывания фосфопептида RRApS16APLP HSPB6 в амфипатической бороздке 14-3-3. Ионы фосфата ингибируют это взаимодействие за счет блокирования амфипатических бороздок 14-3-3. 
  3.	Разработана высокоэффективная система, обеспечивающая ко-экспрессию целевых белков и протеинкиназы А в клетках E.coli. Этот подход облегчает получение белков с высокой степенью фосфорилирования.
  4.	Разработан оригинальный метод получения структур комплексов 14-3-3 с фосфопептидами белков-партнеров, основанный на создании химерных конструкций 14-3-3-пептид и их ко-экспрессии с протеинкиназой А. Эффективность метода продемонстрирована при получении новых кристаллических структур комплексов 14-3-3 с фрагментами различных белков-партнеров (HSPB6, Gli, STARD1, AANAT, BAD и E6).  
  5.	Выявлена структурная разупорядоченность N-концевой области, которая важна для димеризации 14-3-3. Направленный мутагенез в этой области позволил получить мономерные формы 14-3-3 и впервые установить, что они обладают пониженной стабильностью и, одновременно с этим, повышенной гидрофобностью и повышенной антиагрегационной активностью с некоторыми белками-субстратами.   
  Результаты работы доложены на многочисленных российских и международных научных мероприятиях, а также опубликованы в виде 20 статей и 1 главе в книге, входящих в перечень ВАК.
chairman_dissertation_council.name: Владимир
chairman_dissertation_council.surname: Попов
chairman_dissertation_council.patronymic: Олегович
chairman_dissertation_council.position: научный руковдоитель Центра
chairman_dissertation_council.degree: Доктор химических наук
chairman_dissertation_council.rank: Академик
chairman_dissertation_council.wos_research_id: F-8810-2014
chairman_dissertation_council.scopus_author_id: 7404534215
chairman_dissertation_council.rinc_id: 80944
chairman_dissertation_council.orcid: 0000-0002-0133-7962
chairman_dissertation_council.territory: РОССИЯ
organization_supervisor.name: Алексей
organization_supervisor.surname: Федоров
organization_supervisor.patronymic: Николаевич
organization_supervisor.position: директор
organization_supervisor.territory: РОССИЯ
rubrics.code: 34.15.45
rubrics.name: Молекулярная биология подвижности и опорного аппарата клетки
rubrics.code: 34.15.17
rubrics.name: Макромолекулярные ассоциации и проблемы узнавания в молекулярной биологии
rubrics.code: 34.15.15
rubrics.name: Пространственная структура и свойства биополимеров
rubrics.code: 31.27.25
rubrics.name: Биохимия животных
rubrics.code: 31.27.15
rubrics.name: Структура и функции биополимеров
oecds.code: 01.06.DA
oecds.name: BIOPHYSICS
oecds.code: 01.06.CO
oecds.name: BIOCHEMICAL RESEARCH METHODS
oecds.code: 01.06.CQ
oecds.name: BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY
speciality_codes.name: Биохимия
speciality_codes.code: 03.01.04
supervisors.fio: Гусев Н.Б.
supervisors.scientific_degree: Доктор биологических наук
supervisors.speciality_code: Биохимия
supervisors.responsible_type: Научный руководитель
opponents.fio: Кочетков С.Н.
opponents.scientific_degree: Доктор химических наук
opponents.speciality_code: Молекулярная биология
opponents.responsible_type: Оппонент
opponents.fio: Ширинский В.П.
opponents.scientific_degree: Доктор биологических наук
opponents.speciality_code: Биохимия
opponents.responsible_type: Оппонент
opponents.fio: Гривенников И.А.
opponents.scientific_degree: Доктор биологических наук
opponents.speciality_code: Молекулярная биология
opponents.responsible_type: Оппонент
protection_organization.short_name: ФИЦ Биотехнологии РАН
protection_organization.name: Федеральное государственное учреждение "Федеральный исследовательский центр "Фундаментальные основы биотехнологии» Российской академии наук"
protection_organization.ogrn: 1037700131633
protection_organization.organization_type: Организация
protection_organization.okogu: Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
protection_organization.okopf: Федеральные государственные бюджетные учреждения
author_organization.short_name: ФИЦ Биотехнологии РАН
author_organization.name: Федеральное государственное учреждение "Федеральный исследовательский центр "Фундаментальные основы биотехнологии» Российской академии наук"
author_organization.ogrn: 1037700131633
author_organization.organization_type: Организация
author_organization.okogu: Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
author_organization.okopf: Федеральные государственные бюджетные учреждения