name: Влияние T-клеток с химерным антигенным рецептором (CAR-T) на клетки солидных опухолей
keyword_list: солидные опухоли CAR-T-клетки синдром цитокинового шторма
abstract: Иммунотерапия и, в частности, терапия генетически модифицированными лимфоцитами, в т.ч. T-клетками с химерным антигенным рецептором (CAR), является одним из перспективных направлений современной фундаментальной и клинической онкологии. CAR-T-клетки представляют собой Т-лимфоциты, в геном которых ex vivo внедрен ген, кодирующий CAR. Внеклеточный домен данного рецептора обеспечивает распознавание мишени, а внутриклеточный – запускает сигнальный каскад, что в свою очередь приводит к уничтожению опухолевых клеток-мишеней за счет механизмов Т-клеточной цитотоксичности. Несмотря на успех при терапии гематологических новообразований, CAR-T клеточная терапия оказалась малоэффективной применительно к солидным опухолям. С учетом высокой распространенности солидных опухолей (2-е место в структуре общей смертности) и ассоциированной с ними летальностью, решение проблемы применимости CAR-T иммунотерапии для лечения данного типа онкологических заболеваний является чрезвычайно актуальной задачей. Целью работы является оценка эффективности T-клеток с химерным антигенным рецептором (CAR-T) против клеточных и животных моделей солидных опухолей. В работе впервые проведено сравнение эффективности анти-СD19 CAR-T-клеток на нескольких типах моделей солидных опухолей: двумерном монослое, трехмерных опухолеподобных структурах, а также на ксенографтных мышиных моделях. Для достижения цели было проведено: получение целевой плазмидной конструкции;  методом лентивирусной трансдукции получены СAR-T-клетки и клетки солидных опухолей; оценка цитотоксического действия CAR-T-клеток методом MTS-теста; оценка пролиферативной активности клеток солидных опухолей на приборе xCelligence; оценка эффективности CAR-T-клеток методом конфокальной микроскопии; оценена эффективность полученных CAR-T-клеток in vivo на ксенографтной животной модели предстательной железы; оценена возможность изучения синдрома цитокинового шторма ко-культивированием активированных макрофагов и Т- или CAR-T-клеток; оценен цитокиновый профиль методом мультиплексного анализа.    
  В ходе выполнения работы получены Т-клетки, экспрессирующие на поверхности химерный антигенный рецептор (CAR-T-клетки), специфичные к антигену CD19. Эффективность трансдукции лентивирусным препаратом, кодирующим анти-СD19 CAR, составила 86,9 %. Показано, что восприимчивость к цитотоксическому эффекту CAR-T-клеток против двумерных моделей опухолевых клеточных линий зависит от происхождения. Показано, что CAR-T-клетки способны мигрировать вглубь трехмерных опухолеподобных структур и формировать межклеточный контакт с опухолевыми клетками. Показано, что эффективность CAR-T клеток против привитой мышам ксенографтной опухоли предстательной железы РС-3М не была обнаружена. Однако, введение CAR-T клеток привело к снижению образования метастазов в экспериментальной группе животных. Ко-культивирование CAR-T-клеток с макрофагами и опухолевыми клетками с последующим мультиплексным анализом цитокинового профиля супернатантов может применяться в качестве прогностической in vitro модели для оценки риска возникновения синдрома цитокинового шторма.
chairman_dissertation_council.name: Зинаида
chairman_dissertation_council.surname: Абрамова
chairman_dissertation_council.patronymic: Ивановна
chairman_dissertation_council.position: Заместитель председателя
chairman_dissertation_council.degree: Доктор биологических наук
chairman_dissertation_council.rank: Профессор
chairman_dissertation_council.wos_research_id: N-6976-2013
chairman_dissertation_council.scopus_author_id: 24833015100
chairman_dissertation_council.rinc_id: 79195
chairman_dissertation_council.orcid: 0000-0003-3749-3411
chairman_dissertation_council.territory: РОССИЯ
organization_supervisor.name: Дмитрий
organization_supervisor.surname: Таюрский
organization_supervisor.patronymic: Альбертович
organization_supervisor.position: И. о. ректора
organization_supervisor.territory: РОССИЯ
rubrics.code: 34.43.45
rubrics.name: Онкоиммунология
rubrics.code: 34.15.51
rubrics.name: Молекулярная онкология
rubrics.code: 34.15.33
rubrics.name: Молекулярная иммунология
oecds.code: 01.06.CO
oecds.name: BIOCHEMICAL RESEARCH METHODS
oecds.code: 01.06.CQ
oecds.name: BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY
speciality_codes.name: Биохимия
speciality_codes.code: 03.01.04
supervisors.fio: Булатов Э. Р.
supervisors.scientific_degree: Кандидат биологических наук
supervisors.speciality_code: Биохимия
supervisors.responsible_type: Научный руководитель
opponents.fio: Генинг Т. П.
opponents.scientific_degree: Доктор биологических наук
opponents.speciality_code: Биохимия
opponents.responsible_type: Оппонент
opponents.fio: Поташникова Д. М.
opponents.scientific_degree: Кандидат биологических наук
opponents.speciality_code: Клеточная биология, цитология, гистология
opponents.responsible_type: Оппонент
protection_organization.short_name: ФГАОУ ВО "КАЗАНСКИЙ (ПРИВОЛЖСКИЙ) ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ", ФГАОУ ВО КФУ, КФУ, КАЗАНСКИЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ, КАЗАНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ, КАЗАНСКИЙ (ПРИВОЛЖСКИЙ) ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ
protection_organization.name: ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ АВТОНОМНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ "КАЗАНСКИЙ (ПРИВОЛЖСКИЙ) ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ"
protection_organization.ogrn: 1021602841391
protection_organization.supervisor_name: ИЛЬШАТ
protection_organization.supervisor_surname: ГАФУРОВ
protection_organization.supervisor_patronymic: РАФКАТОВИЧ
protection_organization.organization_type: Организация
protection_organization.okogu: Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
protection_organization.okopf: Федеральные государственные автономные учреждения
author_organization.short_name: ФГАОУ ВО "КАЗАНСКИЙ (ПРИВОЛЖСКИЙ) ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ", ФГАОУ ВО КФУ, КФУ, КАЗАНСКИЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ, КАЗАНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ, КАЗАНСКИЙ (ПРИВОЛЖСКИЙ) ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ
author_organization.name: ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ АВТОНОМНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ "КАЗАНСКИЙ (ПРИВОЛЖСКИЙ) ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ"
author_organization.ogrn: 1021602841391
author_organization.supervisor_name: ИЛЬШАТ
author_organization.supervisor_surname: ГАФУРОВ
author_organization.supervisor_patronymic: РАФКАТОВИЧ
author_organization.organization_type: Организация
author_organization.okogu: Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
author_organization.okopf: Федеральные государственные автономные учреждения