name: Взаимодействие проатерогенных дегликозилированных липопротеидов с макрофагами
keyword_list: атеросклероз гликом липопротеиды макрофаг десиалирование
abstract: Объект: первичные моноциты/макрофаги человека, человеческие макрофагоподобные клетки линии THP-1.
  Цель: изучить клеточно-молекулярные механизмы взаимодействия дегликозилированных (десиалированных) липопротеидов низкой и высокой плотности с макрофагами.
  Методы: Выделение липопротеидов. Суммарную фракцию липопротеидов низкой плотности (ЛНП) выделяли последовательным ультрацентрифугированием по методу Lindgren. Подфракции липопротеидов выделяли из плазмы одностадийным, изопикническим, неденатурирующим ультрацентрифугированием в градиенте плотности по методу Chapman с модификациями. Активность ЛХАТ в ЛВП измеряли с использованием флуоресцентного набора для ЛХАТ-активности плазмы (Roar Biomedical, США). Предварительно флуоресцентно меченые N-гликаны разделяли с помощью сверхвысокой жидкостной хроматографии с гидрофильным взаимодействием с детектированием флуоресценции на системе Waters Acquity UHPLC H-class (Милфорд, США). Для десиалирования ЛНП и ЛВП использовали нейраминидазу GlycoCleave® (EnzymeBeads, Германия). Для дегликозилирования ЛВП использовали бета-галактозидазу (New England Biolabs, США) и ПNГазу F (New England Biolabs, США). Моноциты выделяли из крови условно здоровых доноров с помощью парамагнитных наночастиц MicroBeads к человеческому CD14 (Miltenyi Biotec, Германия) на магнитных колонках (Miltenyi Biotec, Германия). Нокдаун генов: использовали shRNA SureSilencing (SABiosciences, США), миРНК (Dharmacon, Thermo Fisher Scientific, США), Lipofectamine RNAiMax (Invitrogen, США), siРНК (Santa Cruz Biotechnology, США). Общее содержание холестерина в клетках THP-1 определяли с помощью анализа холестерина коммерческим набором Amplex Red (Invitrogen, Франция) или Fluitest (Analyticon Biotechnologies AG, Германия). Холестерин нормировали на общий клеточный белок, измеренный по методу Лоури [Lowry и др., 1951].
  Результаты и их новизна: впервые проведена работа по изучению гликанового профиля липопротеидов низкой плотности, в том числе по изменению их гликанового состава при десиалировании, а также впервые продемонстрирована корреляция между гликановым составом и функциями липопротеидов. Впервые, при исследовании профиля активации сигнальных путей в макрофагах при накоплении холестерина в присутствии десиалированных липопротеидов, было установлено, что ЛНП из крови больных атеросклерозом наиболее сходны с десиалированными ЛНП. Впервые подтверждена регулирующая роль генов PERK, IL15, ANXA1, IL7 и IL7R в накоплении холестерина и генов LDLR и INSIG1в оттоке холестерина из макрофагов.
  Степень и эффективность внедрения: получен Патент № 2698199 «Средство для подавления экспрессии генов, связанных с накоплением холестерина макрофагами человека» на использование обнаруженных в ходе диссертационного исследования генов для возможного лечения атеросклероза с помощью подавления экспрессии выявленных генов.
  Применение: Определение гликанового состава липопротеидов может быть использовано в клинической практике для характеристики степени десиалирования циркулирующих липопротеидов и, соответственно, их атерогенного потенциала, которые могут являться биомаркерами сердечно-сосудистых заболеваний.
chairman_dissertation_council.name: Аслан
chairman_dissertation_council.surname: Кубатиев
chairman_dissertation_council.patronymic: Амирханович
chairman_dissertation_council.position: Научный руководитель института
chairman_dissertation_council.degree: Доктор медицинских наук
chairman_dissertation_council.rank: Академик
chairman_dissertation_council.wos_research_id: AAF-8186-2021
chairman_dissertation_council.scopus_author_id: 57189329836
chairman_dissertation_council.rinc_id: 79852
chairman_dissertation_council.url: http://www.ras.ru/win/db/show_per.asp?P=.id-62692.ln-ru
chairman_dissertation_council.orcid: 0000-0001-8077-2905
chairman_dissertation_council.territory: РОССИЯ
organization_supervisor.name: Сергей
organization_supervisor.surname: Морозов
organization_supervisor.patronymic: Георгиевич
organization_supervisor.position: Директор
organization_supervisor.territory: РОССИЯ
rubrics.code: 76.03.53
rubrics.name: Патологическая физиология
oecds.code: 03.01.TM
oecds.name: PATHOLOGY
speciality_codes.name: Патологическая физиология
speciality_codes.code: 3.3.3.
supervisors.fio: Собенин И.А.
supervisors.scientific_degree: Доктор медицинских наук
supervisors.speciality_code: Патологическая физиология
supervisors.responsible_type: Научный руководитель
opponents.fio: Соколов А.В.
opponents.scientific_degree: Доктор биологических наук
opponents.speciality_code: Биохимия
opponents.responsible_type: Оппонент
opponents.fio: Макаревич П.И.
opponents.scientific_degree: Кандидат медицинских наук
opponents.speciality_code: Биохимия
opponents.responsible_type: Оппонент
protection_organization.short_name: ФГБНУ "НИИОПП"
protection_organization.name: ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ НАУЧНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ "НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ОБЩЕЙ ПАТОЛОГИИ И ПАТОФИЗИОЛОГИИ"
protection_organization.ogrn: 1037700256880
protection_organization.supervisor_name: СЕРГЕЙ
protection_organization.supervisor_surname: МОРОЗОВ
protection_organization.supervisor_patronymic: ГЕОРГИЕВИЧ
protection_organization.organization_type: Организация
protection_organization.okogu: Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
protection_organization.okopf: Федеральные государственные бюджетные учреждения
author_organization.short_name: ФГБНУ "НИИОПП"
author_organization.name: ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ НАУЧНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ "НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ОБЩЕЙ ПАТОЛОГИИ И ПАТОФИЗИОЛОГИИ"
author_organization.ogrn: 1037700256880
author_organization.supervisor_name: СЕРГЕЙ
author_organization.supervisor_surname: МОРОЗОВ
author_organization.supervisor_patronymic: ГЕОРГИЕВИЧ
author_organization.organization_type: Организация
author_organization.okogu: Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
author_organization.okopf: Федеральные государственные бюджетные учреждения