name: Кинетические аспекты моделирования старения в экспериментах на непересеваемой культуре клеток
keyword_list: БИОМАРКЁРЫ СТАРЕНИЯ, ГЕРОПРОТЕКТОРЫ, КЛЕТОЧНЫЕ КУЛЬТУРЫ, МЕТАБОЛИЗМ КЛЕТКИ, ЦИТОГЕРОНТОЛОГИЯ
abstract: Объект исследования: культура клеток китайского хомячка. Цель: оценка возможности использования кинетических закономерностей вымирания непересеваемой культуры клеток для изучения механизмов старения и для тестирования потенциальных геропротекторов. В модели "стационарного старения" клеточных культур популяция клеток вымирает в соответствии с законом Гомпертца. Относительный уровень экспрессии генов-регуляторов клеточного цикла и генов, связанных с аутофагией, не различается в клетках разного "стационарного возраста". Исключение составляет ген MAP1LC3A, уровень экспрессии которого понижен в "зрелых" и "умеренно старых" клетках. Активность ассоциированной со старением бета-галактозидазы проявляется в "стационарно старых" клетках и почти не проявляется в "молодых". Хлорид аммония вызывает вакуоляризацию цитоплазмы и способствует снижению плотности культуры клеток, но не влияет на продолжительность их жизни; 2,4-динитрофенол в концентрации 5,6∙10⁻⁷ М не оказывает влияния на рост и гибель культуры клеток; 8-оксо-2"-дезоксигуанозин в концентрации 10⁻³ М не влияет на рост культуры клеток, но уменьшает среднюю продолжительность жизни и достоверно снижает плотность экспериментальных клеток через 25 – 30 сут культивирования. Разбавление на 44,4% модифицированной Дульбекко среды Игла препаратом "Квинтон" способствует увеличению максимальной, средней и модальной продолжительности жизни. При длительном поддержании непересеваемой культуры клеток китайского хомячка необходимо подбирать ростовые среды с высоким содержанием некоторых аминокислот (в первую очередь, незаменимых и глутамина), витаминов и глюкозы. Добавление буфера HEPES не влияет на кинетику гибели клеток и на динамику изменения pH после достижения культурой монослоя. Вымирание культуры клеток в поздней стационарной фазе не может быть обусловлено простой нехваткой питательных веществ или значительным снижением pH. Впервые показано, что клетки млекопитающих в непересеваемой культуре вымирают в соответствии с законом Гомпертца, как и когорты животных или людей. Доказана применимость для изучаемой модели биомаркёра клеточного "возраста" – ассоциированной со старением β-галактозидазы. Не обнаружено аномального увеличения числа копий генов MAP1LC3A, Atg5, PRKAA1, GAPDH, ACTB, B2M, Mki67, Cdkn2a, Tp53 в клетках линии B11-dii FAF28 по сравнению с их числом у китайского хомячка (Cricetulus griseus). При длительном культивировании клеток китайского хомячка необходимо подбирать среды с высоким содержанием незаменимых аминокислот и глюкозы. Подобранные условия культивирования клеток китайского хомячка, методы их исследования и дополнительные "возрастные" характеристики можно рекомендовать для корректной постановки экспериментов на клеточных культурах по поиску геропротекторов с использованием модели "стационарного старения". Предложенный анализ кривых гибели клеток с аппроксимацией уравнением Гомпертца и вычислением средней, медианной, модальной и максимальной продолжительности жизни можно использовать для работы по изучению выживаемости любых культур клеток.
chairman_dissertation_council.surname: Хавинсон В. Х.
chairman_dissertation_council.position: Директор
chairman_dissertation_council.degree: Доктор медицинских наук
organization_supervisor.surname: Хавинсон В. Х.
organization_supervisor.position: Директор
organization_supervisor.degree: Доктор медицинских наук
rubrics.code: 76.29.59
rubrics.name: Геронтология и гериатрия
oecds.code: 03.02.LI
oecds.name: GERIATRICS & GERONTOLOGY
speciality_codes.name: Геронтология и гериатрия
speciality_codes.code: 14.01.30
supervisors.fio: Хохлов А.Н.
supervisors.scientific_degree: Доктор биологических наук
supervisors.speciality_code: Клеточная биология, цитология, гистология
supervisors.responsible_type: Научный руководитель
opponents.fio: Колосова Н.Г.
opponents.scientific_degree: Доктор биологических наук
opponents.speciality_code: Биохимия
opponents.responsible_type: Оппонент
opponents.fio: Кореневский А.В.
opponents.scientific_degree: Доктор биологических наук
opponents.speciality_code: Физиология
opponents.responsible_type: Оппонент
protection_organization.short_name: АНО НИЦ "Санкт-Петербургский институт биорегуляции и геронтологии"
protection_organization.name: Автономная научная некоммерческая организация высшего образования Научно-исследовательский центр "Санкт-Петербургский институт биорегуляции и геронтологии"
protection_organization.ogrn: 1157800005054
protection_organization.organization_type: Организация
protection_organization.okogu: Межрегиональные общественные объединения
protection_organization.okopf: Автономные некоммерческие организации
author_organization.short_name: Биологический факультет МГУ имени М.В.Ломоносова
author_organization.name: Государственное учебно-научное учреждение Биологический факультет Московского государственного университета имени М.В.Ломоносова
author_organization.ogrn: 1037739320750
author_organization.organization_type: Организация
author_organization.okogu: Министерство образования и науки Российской Федерации
author_organization.okopf: Учреждения