name: Моделирование структурно-функциональных особенностей кожи пациентов с врожденным буллезным эпидермолизом с использованием пациент-специфических клеток
keyword_list: Cre-рекомбинация BMI-1 hTERT CRISPR/Cas9 иммортализация кератиноциты фибробласты HaCaT буллезный эпидермолиз
abstract: В работе рассмотрены различные свойства клеток кожи, полученных от пациентов с врожденным буллезным эпидермолизом (ВБЭ), а также создание моделей заболевания с помощью системы редактирования генома на основе CRISPR/Cas9 и систем клеточной иммортализации. Получена новая модель простого ВБЭ с мутациями в экзоне 7 гена krt5, демонстрирующая свойства кератиноцитов простого ВБЭ, а именно агрегацию кератиновой сети и ее зависимость от фосфорилирования, а также увеличение скорости миграции при зарастании раны. Получено 4 новых линии фибробластов и 2 линии кератиноцитов от пациентов с ВБЭ, для которых были выявлены мутации (в т.ч. новые) приводящие к фенотипу рецессивного дистрофического БЭ (РДБЭ). Характеристика данных линий привела к обнаружению сниженной, но не отсутствующей экспрессии коллагена VII типа (С7) во всех линиях, а также фиброзного и стареющего фенотипа фибробластов без признаков онкотрансформации. Подтверждена иммортализация новых линий кератиноцитов и фибробластов от пациентов с РДБЭ и здоровых доноров. Иммортализация фибробластов hTERT, а кератиноцитов hTERT и BMI-1 не оказывает существенного влияния на морфологию клеток и экспрессию клетками специфических белковых маркеров. Также не обнаружено приобретение данными клетками туморогенных свойств. Однако, иммортализация линии здоровых кератиноцитов hTERT привела к получению новой клеточной линии с множеством аберраций хромосомного состава, измененными морфологией, экспрессией маркеров, ростом в культуре и составе реконструированного эпидермиса (РЭ), а также проявляющей туморогенные свойства. Cre-опосредованное удаление hTERT в линиях иммортализованных фибробластов приводит к восстановлению в них части свойств первичных клеток. Получена модель ороговевающего эпидермиса человека in vitro как из первичных кератиноцитов, так и из иммортализованных. При этом РЭ из кератиноцитов иммортализованных hTERT и BMI-1 не имел существенных отличий от РЭ из первичных клеток. РЭ из кератиноцитов РДБЭ демонстрировал пониженную экспрессию С7.
chairman_dissertation_council.name: Николай
chairman_dissertation_council.surname: Озернюк
chairman_dissertation_council.patronymic: Дмитриевич
chairman_dissertation_council.position: заведующий лабораторией
chairman_dissertation_council.degree: Доктор биологических наук
chairman_dissertation_council.rank: Профессор
chairman_dissertation_council.wos_research_id: K-9087-2014
chairman_dissertation_council.scopus_author_id: 6603747506
chairman_dissertation_council.territory: РОССИЯ
organization_supervisor.name: Андрей
organization_supervisor.surname: Васильев
organization_supervisor.patronymic: Валентинович
organization_supervisor.position: директор
organization_supervisor.territory: РОССИЯ
rubrics.code: 34.19.17
rubrics.name: Цитоморфология
rubrics.code: 34.19.21
rubrics.name: Особенности поведения клеток в культуре
rubrics.code: 34.19.05
rubrics.name: Методы и аппаратура в цитологии
oecds.code: 01.06.CU
oecds.name: BIOLOGY
oecds.code: 01.06.DR
oecds.name: CELL BIOLOGY
speciality_codes.name: Клеточная биология, цитология, гистология
speciality_codes.code: 03.03.04
supervisors.fio: Воротеляк Е.А.
supervisors.scientific_degree: Доктор биологических наук
supervisors.speciality_code: Клеточная биология, цитология, гистология
supervisors.responsible_type: Научный руководитель
opponents.fio: Гривенников И.А.
opponents.scientific_degree: Доктор биологических наук
opponents.speciality_code: Молекулярная биология
opponents.responsible_type: Оппонент
opponents.fio: Егоров Е.Е.
opponents.scientific_degree: Доктор биологических наук
opponents.speciality_code: Молекулярная биология
opponents.responsible_type: Оппонент
protection_organization.short_name: ИБР РАН
protection_organization.name: ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ ИНСТИТУТ БИОЛОГИИ РАЗВИТИЯ ИМ. Н.К. КОЛЬЦОВА РАН
protection_organization.ogrn: 1027700450800
protection_organization.supervisor_name: АНДРЕЙ
protection_organization.supervisor_surname: ВАСИЛЬЕВ
protection_organization.supervisor_patronymic: ВАЛЕНТИНОВИЧ
protection_organization.organization_type: Организация
protection_organization.okogu: Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
protection_organization.okopf: Федеральные государственные бюджетные учреждения