name: Гемостатическое звено эндотелиальной дисфункции при развитии осложнений у пациентов с периферическим атеросклерозом
keyword_list: эндотелиальная дисфункция тромбоз рестеноз периферический атеросклероз атеросклероз
abstract: Объект исследования: в рамках экспериментальной части исследования - первичные культуры эндотелиальных клеток пупочной вены человека (human umbilical vein endo-thelial cells, HUVEC); в рамках клинической части исследования – больные со 2б-4 стадией хронической ишемии по классификации А.В. Покровского-Фонтейна (категории 3-5 Rutherford) вследствие заболевания периферических артерий атеросклеротической этиологии, которым проводилось консервативное лечение согласно Российским клиническим рекомендациям либо рентгенэндоваскулярные ангиопластика и/или стентирование артерий нижних конечностей либо реконструктивные шунтирующие операции на артериях нижних конечностей с использованием синтетических протезов. Цель работы: улучшение результатов консервативного, эндоваскулярного, открытого хирургического лечения у пациентов с периферическим атеросклерозом и создание моделей прогнозирования неблагоприятных исходов на основании оценки показателей гемостатического звена дисфункции эндотелия. Методы исследования: в ходе in vitro исследования оценивалась принадлежность выделенных первичных культур клеток к линии HUVEC при помощи метода иммуноцитохимии. Далее оценивалась цитотоксичность ключевых материалов, используемых в сосудистой хирургии (ПТФЭ, ПЭТ, нитинол) при инкубации с ними первичных культур HUVEC при помощи MTS-теста. Миграционная активность культуры эндотелиоцитов при воздействии вышеуказанных материалов изучалась при помощи теста «заживления повреждения (царапины)» с последующими микроскопией и фотодокументированием. Изучались гемостатические маркеры дисфункции эндотелия: фактор коагуляции 8 (FVIII), фактор фон Виллебранда (vWF), ингибитор активации плазминогена-1 (PAI-1), растворимые эндотелиальные рецепторы протеина С (sEPCR) и оксид азота II (NO). Активность vWF в кондиционной среде определялась при помощи методики агглютинации тромбоцитов с использованием реагента VW Reagent, активность фактора коагуляции FVIII - клоттинговым гемостазиологическим методом, уровни PAI-1 и sEPCR - методом иммуноферментного анализа. Содержание метаболитов оксида азота II в кондиционной среде определялось спектрофотоколориметрически. Экспрессия маркеров гемостатического звена дисфункции эндотелия в культуре HUVEC оценивалась методом Вестерн-блот. В рамках клинической части исследования проводились физикальные, лабораторные и инструментальные обследования. Инструментальные методы включили ультразвуковую допплерографию с измерением лодыжечно-плечевого индекса, ультразвуковое исследование артерий нижних конечностей, субтракционную ангиографическое исследование периферического артериального русла, электрокардиографию. Показатели гемостатического звена эндотелиальной дисфункции в периферической крови больных изучались при помощи методов аналогично in vitro исследованию. Помимо этого, в ходе клинической части исследования у пациентов с периферическим атеросклерозом проводилась оценка антигена vWF методом иммуноферментного анализа и активности протеина С - с использованием хромогенного метода с субстратом на автоматическом коагулометре. Использовались статистические методы обработки полученных данных. Научная новизна: в рамках экспериментальной части исследования проведена in vitro оценка метаболической активности первичных культур HUVEC, изучение миграционной активности культуры эндотелиоцитов, а также показателей активности и уровня параметров гемостатического звена дисфункции эндотелия при воздействии основных материалов, применяемых в реконструктивной артериальной хирургии (ПТФЭ, ПЭТ, нитинол); в рамках клинической части диссертационного исследования у 167 больных с заболеваниями периферических артерий атеросклеротической этиологии при различных методах лечения (консервативное, эндоваскулярное, открытое хирургическое) впервые выполнена интегральная оценка показателей гемостатического звена дисфункции эндотелия (активности FVIII, vWF, уровней PAI-1, sEPCR, АГ vWF, метаболитов NO) в зависимости от характера и протяженности поражения артериального русла, тяжести ишемии, наличия сопутствующей патологии. Разработаны прогностические модели развития неблагоприятных исходов у больных с периферическим атеросклерозом в зависимости от активности и уровня показателей гемостатического звена дисфункции эндотелия, наличия сопутствующей патологии. Теоретические и практические результаты: полученные результаты используются в учебной работе высших медицинских учебных заведений для подготовки врача-лечебника, подготовке научно-педагогических кадров вузов; результаты исследования окажут положительное влияние на расширение теоретических и практических знаний о гемостатическом звене эндотелиальной дисфункции. Проведено in vitro изучение активности и уровней показателей функции эндотелия, ассоциированных с гиперкоагуляцией, при воздействии различных материалов, используемых в реконструктивной артериальной хирургии (ПТФЭ, ПЭТ, нитинол) на клеточные элементы сосудистой стенки, в частности, первичные культуры HUVEC. Результаты диссертационного исследования применяются в практическом здравоохранении, а именно в сердечно-сосудистой хирургии, кардиологии. В рамках клинической части эксперимента показана высокая прогностическая роль оценки гемостатических маркеров дисфункции эндотелия (активности FVIII, vWF, уровней PAI-1, sEPCR и метаболитов оксида азота (II) как интегрального показателя функции эндотелиоцитов) в развитии неблагоприятных исходов заболеваний периферических артерий атеросклеротической этиологии, а именно: рестеноза, инфаркта миокарда, летальных исходов, что может оказать существенное влияние на тактику лечения пациентов с периферическим атеросклерозом и улучшение прогнозов. Формы внедрения: опубликовано 32 научных труда, из них 13 статей в рецензируемых научных журналах, рекомендованных ВАК при Минобрнауки России, 8 – в изданиях, входящих в международную цитатно-аналитическую базу данных Scopus, издана 1 научная монография, 1 учебное пособие, получено 3 патента РФ на изобретение, внедрено 2 рационализаторских предложения; результаты исследования внедрены в лечебную работу отделения сосудистой хирургии Государственного бюджетного учреждения Рязанской области «Городская клиническая больница скорой медицинской помощи», отделения сосудистой хирургии Государственного бюджетного учреждения Рязанской области «Областная клиническая больница», а также в учебный процесс кафедры сердечно-сосудистой, рентгенэндоваскулярной хирургии и лучевой диагностики ФГБОУ ВО РязГМУ Минздрава России. Область применения: сердечно-сосудистая хирургия.
chairman_dissertation_council.name: Роман
chairman_dissertation_council.surname: Калинин
chairman_dissertation_council.patronymic: Евгеньевич
chairman_dissertation_council.position: заведующий кафедрой сердечно-сосудистой, рентгенэндоваскулярной хирургии и лучевой диагностики
chairman_dissertation_council.degree: Доктор медицинских наук
chairman_dissertation_council.rank: Профессор
chairman_dissertation_council.wos_research_id: M-1554-2016
chairman_dissertation_council.scopus_author_id: 24331764400
chairman_dissertation_council.rinc_id: 528201
chairman_dissertation_council.orcid: 0000-0002-0817-9573
chairman_dissertation_council.territory: РОССИЯ
organization_supervisor.name: Ольга
organization_supervisor.surname: Казаева
organization_supervisor.patronymic: Викторовна
organization_supervisor.position: начальник отдела подготовки научно-педагогических кадров, интеллектуальной собственности
organization_supervisor.territory: РОССИЯ
rubrics.code: 76.29.30
rubrics.name: Кардиология и ангиология
oecds.code: 03.02.DQ
oecds.name: CARDIAC & CARDIOVASCULAR SYSTEMS
speciality_codes.name: Сердечно-сосудистая хирургия
speciality_codes.code: 14.01.26
supervisors.fio: Калинин Р.Е.
supervisors.scientific_degree: Доктор медицинских наук
supervisors.speciality_code: Сердечно-сосудистая хирургия
supervisors.responsible_type: Научный руководитель
opponents.fio: Аракелян В.С.
opponents.scientific_degree: Доктор медицинских наук
opponents.speciality_code: Сердечно-сосудистая хирургия
opponents.responsible_type: Оппонент
opponents.fio: Сапелкин С.В.
opponents.scientific_degree: Доктор медицинских наук
opponents.speciality_code: Сердечно-сосудистая хирургия
opponents.responsible_type: Оппонент
opponents.fio: Казаков Ю.И.
opponents.scientific_degree: Доктор медицинских наук
opponents.speciality_code: Сердечно-сосудистая хирургия
opponents.responsible_type: Оппонент
protection_organization.short_name: ФГБОУ ВО РЯЗГМУ МИНЗДРАВА РОССИИ
protection_organization.name: ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ "РЯЗАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ АКАДЕМИКА И.П. ПАВЛОВА" МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
protection_organization.ogrn: 1036212013408
protection_organization.supervisor_name: РОМАН
protection_organization.supervisor_surname: КАЛИНИН
protection_organization.supervisor_patronymic: ЕВГЕНЬЕВИЧ
protection_organization.organization_type: Организация
protection_organization.okogu: Министерство здравоохранения Российской Федерации
protection_organization.okopf: Федеральные государственные бюджетные учреждения
author_organization.short_name: ФГБОУ ВО РЯЗГМУ МИНЗДРАВА РОССИИ
author_organization.name: ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ "РЯЗАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ АКАДЕМИКА И.П. ПАВЛОВА" МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
author_organization.ogrn: 1036212013408
author_organization.supervisor_name: РОМАН
author_organization.supervisor_surname: КАЛИНИН
author_organization.supervisor_patronymic: ЕВГЕНЬЕВИЧ
author_organization.organization_type: Организация
author_organization.okogu: Министерство здравоохранения Российской Федерации
author_organization.okopf: Федеральные государственные бюджетные учреждения