name: Группоспецифические вируснейтрализующие рекомбинантные антитела против иммунодоминантного белка р35 ортопоксвирусов: получение и характеризация
keyword_list: РЕКОМБИНАНТНЫЕ АНТИТЕЛА,  ОРТОПОКСВИРУСЫ
abstract: Семейство Poxviridae включает сложные ДНК-содержащие вирусы, которые реплицируются в цитоплазме клеток позвоночных и беспозвоночных. Род Orthopoxvirus наиболее известен в семействе Poxviridae. К этому роду относится большая часть патогенных для человека поксвирусов. Наиболее опасным является вирус натуральной оспы (ВНО), естественная трансмиссия которого была прервана в 1977 г. благодаря применению профилактических прививок вирусом осповакцины (ВОВ). Известно, что вакцинация ВОВ способствует формированию длительного иммунитета у вакцинированных людей. Но, давая надежную защиту, оспопрививание может сопровождаться рядом осложнений, особенно у людей с врожденным или приобретенным иммунодефицитом, поэтому существует необходимость в разработке специфических средств профилактики поствакцинальных осложнений. В настоящее время таким средством является так называемый вакцинный иммуноглобулин (VIG), получаемый из сыворотки крови вакцинированных доноров, однако использование препаратов, полученных из человеческой крови, всегда сопровождается определенным риском. Альтернативу VIG могли бы составить человеческие моноклональные антитела против ортопоксвирусов. Разработка рекомбинантных антител открывает новые перспективы в этой области. В настоящее время наиболее предпочтительными являются полностью человеческие рекомбинантные антитела. Для их создания используют объединение вариабельных доменов антител человека, обладающих целевой активностью, с константными доменами иммуноглобулинов человека нужного изотипа. Один из способов получения целевых вариабельных доменов – их отбор из комбинаторных фаговых библиотек мини-антител человека. Важно, чтобы отобранные вариабельные домены обеспечивали вируснейтрализующие и/или протективные свойства созданных на их основе рекомбинантных антител. Цель: отобрать группоспецифические антитела, нейтрализующие инфекционность патогенных для человека ортопоксвирусов, и локализовать эпитоп, взаимодействующий с этими антителами. Получены одноцепочечные антитела человека против ВЭ, штамм К1. Определены аминокислотные последовательности полученных антител. Исследовано связывание антител с различными ортопоксвирусами. Показано, что антитела, отобранные против непатогенного для человека ВЭ, способны нейтрализовать in vitro вирусную активность высокопатогенного ВНО, штамм Ind-3A. Получены: рекомбинантные плазмидные ДНК, обеспечивающие продукцию полноразмерных человеческих антител класса IgG1, способных нейтрализовать ортопоксвирусы; линии эукариотических клеток, стабильно продуцирующие полноразмерные антитела человека, подавляющие инфекционность ортопоксвирусов in vitro. Определен белок-мишень для вируснейтрализующих антител – белок р35 ортопоксвирусов. Сконструированы плазмидные ДНК, на основе которых получена панель штаммов E. сoli, продуцирующих укороченные варианты белка р35 ортопоксвирусов. Локализован новый вируснейтрализующий эпитоп в составе белка р35 ортопоксвирусов с использованием созданных укороченных белков, а также методом пептидного дисплея. Определена нуклеотидная последовательность, кодирующая белок р35 ВЭ, штамм К1. Показано, что иммунизация мышей укороченным вариантом белка р35 вызывает у них наработку вируснейтрализующих антител.
chairman_dissertation_council.surname: Пышный Д. В.
chairman_dissertation_council.position: Директор
chairman_dissertation_council.degree: Доктор химических наук
organization_supervisor.surname: Пышный Д. В.
organization_supervisor.position: Директор
organization_supervisor.degree: Доктор химических наук
rubrics.code: 34.15.31
rubrics.name: Молекулярная биология вирусов
rubrics.code: 34.15.33
rubrics.name: Молекулярная иммунология
rubrics.code: 31.27.15
rubrics.name: Структура и функции биополимеров
oecds.code: 01.06.CO
oecds.name: BIOCHEMICAL RESEARCH METHODS
oecds.code: 01.06.DA
oecds.name: BIOPHYSICS
oecds.code: 01.06.CQ
oecds.name: BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY
speciality_codes.name: Молекулярная биология
speciality_codes.code: 03.01.03
supervisors.fio: Тикунова Н. В.
supervisors.scientific_degree: Доктор биологических наук
supervisors.speciality_code: Молекулярная биология
supervisors.responsible_type: Научный руководитель
opponents.fio: Бунева В. Н.
opponents.scientific_degree: Доктор биологических наук
opponents.speciality_code: Биохимия
opponents.responsible_type: Оппонент
opponents.fio: Глушков А. Н.
opponents.scientific_degree: Доктор медицинских наук
opponents.speciality_code: Иммунология
opponents.responsible_type: Оппонент
protection_organization.short_name: ИХБФМ СО РАН
protection_organization.name: Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт химической биологии и фундаментальной медицины Сибирского отделения Российской академии наук
protection_organization.ogrn: 1025403659852
protection_organization.organization_type: Организация
protection_organization.okogu: Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
protection_organization.okopf: Федеральные государственные бюджетные учреждения
author_organization.short_name: ИХБФМ СО РАН
author_organization.name: Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт химической биологии и фундаментальной медицины Сибирского отделения Российской академии наук
author_organization.ogrn: 1025403659852
author_organization.organization_type: Организация
author_organization.okogu: Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
author_organization.okopf: Федеральные государственные бюджетные учреждения