name: Генетическая модификация клеток Escherichia coli с целью обеспечения их аденозинтрифосфатом в условиях сверхсинтеза L-гистидина
keyword_list: мембранная Н+-пирофосфатаза транспортер PitA 5-аминоимидазол-4-карбоксамидрибонуклеотид (AICAR) продуцент L-гистидина аденозинтрифосфат (АТФ) Escherichia coli
abstract: Диссертационная работа Малых Е.А. посвящена поиску новых подходов к обеспечению клеток Escherichia coli аденозинтрифосфатом в условиях сверхпродукции L-гистидина, а также применение данных подходов для улучшения свойств штаммов – продуцентов этой аминокислоты. Впервые показано, что у E. coli побочный продукт биосинтеза L-гистидина, АИКАР, подавляет активность ключевого фермента пути биосинтеза, АТФ-фосфорибозилтрансферазы (АТФ-ФРТ). Также, были приведены данные, свидетельствующие о том, что АИКАР негативно влияет на индукцию pho-регулона. На основе ранее описанного штамма-продуцента L-гистидина E. coli был получен новый штамм, способный к увеличенному накоплению целевого продукта (за счет сверхэкспрессии генов purH и purA, а также инактивации фосфатного транспортера PitA). В дополнение было продемонстрировано положительное влияние инактивации трансляционного фактора EttA на продукцию L-гистидина.
  Показано, что увеличение в хромосоме E. coli числа копий оперонов (atp и nuo), кодирующих H+-ATФ-синтазу и NADH:убихинон-оксидоредуктазу I (NDH-1), соответственно, может стимулировать накопление биомассы и/или скорость роста культуры как при высокой, так и при низкой аэрации. Сконструированы штаммы E. coli, содержащие известную мутацию nuoFE183A, придающую NDH-1 способность окислять как NADH, так и NADPH. Было продемонстрировано, что применение мутантного комплекса NDH-1 с измененной субстратной специфичностью повышает продукцию L-гистидина штаммом-продуцентом.
  Впервые показана возможность замены в клетках E. сoli гена жизненно важной цитоплазматической пирофосфатазы ppa на ген мембранной пирофосфатазы hppaRru из Rhodospirillum rubrum. Данная замена в штамме-продуценте L-гистидина приводила к увеличению накопления этой аминокислоты на 30%.
chairman_dissertation_council.name: Илья
chairman_dissertation_council.surname: Захаров-Гезехус
chairman_dissertation_council.patronymic: Артемьевич
chairman_dissertation_council.position: главный научный сотрудник
chairman_dissertation_council.degree: Доктор биологических наук
chairman_dissertation_council.rank: Член-корреспондент РАН
chairman_dissertation_council.wos_research_id: -
chairman_dissertation_council.scopus_author_id: 7202049481
chairman_dissertation_council.rinc_id: 74979
chairman_dissertation_council.territory: РОССИЯ
organization_supervisor.name: Александр
organization_supervisor.surname: Кудрявцев
organization_supervisor.patronymic: Михайлович
organization_supervisor.position: директор
organization_supervisor.territory: РОССИЯ
rubrics.code: 34.27.21
rubrics.name: Генетика и селекция микроорганизмов
rubrics.code: 34.23.17
rubrics.name: Биохимическая генетика
rubrics.code: 34.15.27
rubrics.name: Генетическая инженерия
rubrics.code: 34.15.23
rubrics.name: Молекулярная генетика
oecds.code: 01.06.CQ
oecds.name: BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY
oecds.code: 01.06.QU
oecds.name: MICROBIOLOGY
oecds.code: 01.06.CO
oecds.name: BIOCHEMICAL RESEARCH METHODS
oecds.code: 02.08.DB
oecds.name: BIOTECHNOLOGY & APPLIED MICROBIOLOGY
oecds.code: 02.11.JY
oecds.name: FOOD SCIENCE & TECHNOLOGY
speciality_codes.name: Генетика
speciality_codes.code: 1.5.7.
supervisors.fio: Стойнова Н.В.
supervisors.scientific_degree: Кандидат биологических наук
supervisors.speciality_code: Молекулярная биология
supervisors.responsible_type: Научный руководитель
supervisors.fio: Лившиц В.А.
supervisors.scientific_degree: Доктор биологических наук
supervisors.speciality_code: Генетика
supervisors.responsible_type: Научный руководитель
opponents.fio: Синеокий С.П.
opponents.scientific_degree: Доктор биологических наук
opponents.speciality_code: Генетика
opponents.responsible_type: Оппонент
opponents.fio: Карпов Д.С.
opponents.scientific_degree: Кандидат биологических наук
opponents.speciality_code: Молекулярная биология
opponents.responsible_type: Оппонент
protection_organization.short_name: ИОГЕН РАН
protection_organization.name: ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ ИНСТИТУТ ОБЩЕЙ ГЕНЕТИКИ ИМ. Н.И. ВАВИЛОВА РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК
protection_organization.ogrn: 1037739549748
protection_organization.supervisor_name: АЛЕКСАНДР
protection_organization.supervisor_surname: КУДРЯВЦЕВ
protection_organization.supervisor_patronymic: МИХАЙЛОВИЧ
protection_organization.organization_type: Организация
protection_organization.okogu: Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
protection_organization.okopf: Федеральные государственные бюджетные учреждения
author_organization.short_name: ЗАО "АГРИ"
author_organization.name: Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика"
author_organization.ogrn: 1037739522006
author_organization.organization_type: Организация
author_organization.okogu: Федеральная налоговая служба
author_organization.okopf: Непубличные акционерные общества